Saltar ao contido

Cloranfenicol acetiltransferase

Na Galipedia, a Wikipedia en galego.
Cloranfenicol acetiltransferase
Diagrama de fitas do trímero de cloranfenicol acetiltransferase co cloranfenicol unido. De PDB 3CLA.
Identificadores
SímboloCAT
PfamPF00302
InterProIPR001707
PROSITEPDOC00093
SCOPe3cla / SUPFAM
Cloranfenicol acetiltransferase
Identificadores
Número EC 2.3.1.28
Número CAS 9040-07-7
Bases de datos
IntEnz vista de IntEnz
BRENDA entrada de BRENDA
ExPASy vista de NiceZyme
KEGG entrada de KEGG
MetaCyc vía metabólica
PRIAM perfil
Estruturas PDB RCSB PDB PDBe PDBj PDBsum
Gene Ontology AmiGO / EGO

A cloranfenicol acetiltransferase (ou CAT) é un encima bacteriano (EC 2.3.1.28)[1] que detoxifica o antibiótico cloranfenicol e é responsable da resistencia ao cloranfenicol en bacterias.[2] Este encima une covalentemente un grupo acetilo procedente do acetil-CoA ao cloranfenicol, o cal impide que o cloranfenicol se una aos ribosomas. Un residuo de histidina, localizado na sección C-terminal do encima, xoga un papel central no seu mecanismo catalítico.

Determinouse a estrutura cristalina do encima tipo III de Escherichia coli co cloranfenicol unido. A CAT é un trímero de subunidades idénticas (monómero Mr 25.000) e a estrutura trímera está estabilizada por varias pontes de hidróxeno, algunhas das cales orixínan a extensión dunha folla beta na interface das subunidades. O cloranfenicol únese nun peto profundo localizado no límite entre as subunidades adxacentes do trímero, para que a maioría dos residuos que forman o peto de unión pertenzan a unha subunidade, mentres que a histidina cataliticamente esencial pertence á subunidade adxacente. A His195 está situada apropiadamente para actuar como catalizador básico xeral na reacción, e a estabilización tautomérica necesaria proporciónaa unha interacción pouco común cun oxíxeno do carbonilo da cadea principal.[3]

Aplicación

[editar | editar a fonte]

A CAT utilízase como sistema reporteiro para medir o nivel dun promotor ou da súa expresión específica de tecido en experimentos de ADN recombinante. O ensaio da CAT supón monitorizar a acetilación de cloranfenicol etiquetado radioactivamente na placa TLC; a actividade da CAT determínase buscando a forma acetilada do cloranfenicol, a cal ten unha velocidade de migración significativamente maior comparada coa forma non acetilada.[4]

  1. Engel J, Prockop DJ (1991). "The zipper-like folding of collagen triple helices and the effects of mutations that disrupt the zipper". Annu. Rev. Biophys. Biophys. Chem. 20 (1): 137–152. PMID 1867713. doi:10.1146/annurev.bb.20.060191.001033. 
  2. Shaw WV, Packman LC, Burleigh BD, Dell A, Morris HR, Hartley BS (1979). "Primary structure of a chloramphenicol acetyltransferase specified by R plasmids". Nature 282 (5741): 870–2. Bibcode:1979Natur.282..870S. PMID 390404. doi:10.1038/282870a0. 
  3. Leslie AG (1990). "Refined crystal structure of type III chloramphenicol acetyltransferase at 1.75 A resolution". J. Mol. Biol. 213 (1): 167–186. PMID 2187098. doi:10.1016/S0022-2836(05)80129-9. 
  4. Gorman, CM; Moffat LF; Howard BH (1982). "Recombinant genomes which express chloramphenicol acetyltransferase in mammalian cells". Mol. Cell. Biol. 2 (9): 1044–1051. PMC 369897. PMID 6960240. doi:10.1128/MCB.2.9.1044. 

Este artigo incorpora textos en dominio público procedentes de Pfam e InterPro IPR001707