Técnica de May Grünwald Giemsa

Na Galipedia, a Wikipedia en galego.
Saltar ata a navegación Saltar á procura

A técnica de May Grünwald Giemsa emprégase para a demostración de bacterias ou outros microorganismos en sangue.

Características[editar | editar a fonte]

O frotis, una vez seco, fíxase e tínguese mediante colorantes adecuados. Xeralmente, nos laboratorios hematolóxicos empregan colorantes baseados na tinguidura de Romanowsky, baseada nunha combinación de eosina e azul de metileno. Aínda que cada laboratorio emprega a súa receita, os colorantes e os métodos de tinguidura máis empregados son os de Giemsa, Wright e May Grünwald Giemsa.

A técnica de May Grünwald Giemsa baséase na acción complementaria de dous colorantes neutros e na afinidade dos elementos celulares polos colorantes ácidos ou básicos. Estes dous colorantes son May Grünwald e Giemsa, son solubles en alcohol metílico e son, polo tanto, inactivos: é o contacto coa auga o que lles da un poder colorante. As sales disócianse entón coloreando ácido (eosina) e básico (azul de metileno).

Ocasionalmente utilízase en tecidos incluídos en parafina e cortados a 6 micras.

Reactivos[editar | editar a fonte]

  1. Solución stock de Jenner:
    1. Líquido de Jenner, 1gr
    2. Alcohol metílico, 400cc
  2. Solución de traballo de Jenner:
    1. Solución stock de Jenner, 25cc
    2. Auga destilada, 25cc
  3. Solución colorante de Giemsa:
    1. Giemsa en po, 1gr
    2. Glicerina, 66cc
    3. Alcohol metílico, 66cc

Misturar o Giemsa coa glicerina. Metelo na estufa a 60 °C durante 2 horas. Engadir o alcohol e mesturar ben.

  1. Solución diferenciadora de resina ó 1%
    1. Resina, 1gr
    2. Alcohol etílico ó 95 %, 100cc
    3. Auga destilada (buffer pH 7):
      1. Solución A
        1. Fosfato dibásico sódico, 9,47 gr
        2. Auga destilada, 1000cc
      2. Solución B
        1. Fosfato monobásico potásico, 9,80 gr
        2. Auga destilada, 1000cc

Para cada 100 ml de auga destilada (buffer pH 7), combinar: 49.6 ml de solución a 50.4 ml de solución b.

Procedemento[editar | editar a fonte]

  1. Desparafinar e hidratar ata a auga destilada.
  2. Meter en alcohol metílico, 2 cambios de 5 minutos cada un.
  3. Poñer os portaobxectos en solución de traballo de Jenner durante 6 minutos.
  4. Aclarar na solución de auga destilada (buffer pH 7).
  5. Poñer os portaobxectos en solución de Giemsa 45 minutos.
  6. Aclarar rapidamente na solución diferenciadora de resina. Chequear ó microscopio.
  7. Aclarar en auga destilada.
  8. Deshidratar en alcohol de graduación ascendente.
  9. Aclarar en xilol e montar.

Resultados[editar | editar a fonte]

  • Núcleo: azul.
  • Citoplasma: rosa a rosa escuro.
  • Bacterias: azul palo.

Véxase tamén[editar | editar a fonte]

Bibliografía[editar | editar a fonte]

  • ARP, ed. (1992). Métodos Histotecnológicos. Instituto de patología de las Fuerzas Armadas de los EEUU (AFIP). 

Ligazóns externas[editar | editar a fonte]