Diferenzas entre revisións de «ADN recombinante»

Saltar ata a navegación Saltar á procura
{{Artigo principal|Clonación molecular}}
 
A [[clonación molecular]] é o método de laboratorio usado para crear ADN recombinante.<ref name="isbn0-201-75054-6">{{cite book |author1=Campbell, Neil A. |author2=Reece, Jane B.. |lastauthoramp=yes |title=Biology (6th ed.) |publisher=Addison Wesley |location=San Francisco |year=2002 |pages=375–401 |isbn=978-0-201-75054-6 |oclc= |doi= }}</ref><ref name="isbn0-8153-4111-3">{{cite book |author1=Peter Walter |author2=Alberts, Bruce |author3=Johnson, Alexander S. |author4=Lewis, Julian |author5=Raff, Martin C. |author6=Roberts, Keith |title=Molecular Biology of the Cell (5ª edición, ampliada) |publisher=Garland Science |location=New York |year=2008 |pages= |isbn=978-0-8153-4111-6 |oclc= |doi= }}. A 4ª edición está dispoñible en liña no NCBI Bookshelf: [https://www.ncbi.nlm.nih.gov/bookshelf/br.fcgi?book=mboc4 link]</ref><ref name=isbn1-4292-2936-5>{{cite book |author1=Berg, Jeremy Mark |author2=Tymoczko, John L. |author3=Stryer, Lubert |title=Biochemistry, 7th ed. (Biochemistry (Berg)) |publisher=W.H. Freeman & Company |location= |year=2010 |pages= |isbn=978-1-4292-2936-4 |oclc= |doi= }} A 5ª edición estañ dispoñible en liña no NCBI Bookshelf: [https://www.ncbi.nlm.nih.gov/bookshelf/br.fcgi?book=stryer link]</ref><ref name="isbn0-7167-2866-4">{{cite book |author=Watson, James D. |title=Recombinant DNA: Genes and Genomes: A Short Course |publisher=W.H. Freeman |location=San Francisco |year=2007 |pages= |isbn=978-0-7167-2866-5 |oclc= |doi= }}</ref> É un dos dosudous métodos máis amplamente usados, xunto coa [[reacción en cadea da polimerase]] (PCR), usadautilizada para dirixir a replicación de calquera secuencia específica de ADN desexada. Hai dúas diferenzas fundamentais entre os dous métidosmétodos. Unha é que a clonación molecular implica a replicación do ADN dentro dunha célula viva, mentres que a PCR replica o ADN nun tubo de ensaio, sen células vivas. Outra diferenza é que a clonación implica cortar e pegar secuencias de ADN, mentres que a PCR amplifica copiándoa unha secuencia existente copiándoa.
 
A formación do ADN recombinante require un [[Vector (bioloxía molecular)|vector de clonación]], unha molécula de ADN que leve o ADN ao interior da célula viva. Os vectores xeralmente derivan de [[plásmido]]s ou [[virus]] e son segmentos relativamente pequenos de ADN que conteñen os sinais xenéticos necesarios para a replicación, así como elementos adicionais convenientes no ADN alleo inserido, que identifican as células que conteñen o ADN recombinante e, cando é apropiado, expresan o ADN alleo. A elección do vector para unha clonación molecular depende do organismo hóspede utilizado, o tamaño do ADN que vai ser clonado e de se o ADn alleo vai ser expresado e como.<ref name="isbn0-87969-576-5">{{cite book |author1=Russell, David W. |author2=Sambrook, Joseph |title=Molecular cloning: a laboratory manual |publisher=Cold Spring Harbor Laboratory |location=Cold Spring Harbor, N.Y |year=2001 |pages= |isbn=978-0-87969-576-7 |oclc= |doi= |url=https://archive.org/details/molecularcloning0000samb_p7p5 }}</ref> Os segmentos de ADN poden combinarse usando unha variedade de métodos, como a clonación con [[encima de restrición|encimas de restrición]]/[[ligase]]s ou a [[ensamblaxe de Gibson]].
190.249

edicións

Menú de navegación