Diferenzas entre revisións de «EcoRV»

Saltar ata a navegación Saltar á procura
sen resumo de edición
== Modo de acción ==
 
LikeIgual que [[EcoRI]], EcoRV formsforma aun [[homodimerhomodímero]] inen solutionsolución beforeantes bindingde andunirse actinge onactuar itssobre a súa [[recognitionsecuencia sequencede recoñecemento]]. <ref name=Bitinaite_et_al_2001>{{cite journal |author=Bitinaite J, Wah D A, Aggarwal A K, Schildkraut I |title=FokI dimerization is required for DNA cleavage |journal=Proc Natl Acad Sci USA |volume=95 |issue=18 |pages=10570–10575 |year=1998|pmid=9724744 |doi=10.1073/pnas.95.18.10570 |pmc=27935 }}</ref> InitiallyInicialmente, theo enzymeencima bindsúnese weakly tofeblemente a non-specificun sitesitio onnon theespecífico do DNAADN. ItDesprázase randomlyaleatoriamente walksao alonglongo theda moleculemolécula untilde theADN specificata recognitionque atopa siteo isseu sitio de foundrecoñecemento. <ref name="Pingoud_&_Jeltsch_2001"/> EcoRV hasten aunha highalta specificityespecificidade forpola itssúa targetsecuencia diana no ADN.<ref>Zahran, M., Daidone, I., Smith, J. C., & Imhof, P. (2010). Mechanism of DNA sequencerecognition by the restriction enzyme EcoRV. Journal of molecular biology, 401(3), 415-432.</ref>
 
A unión do encima induce un cambio conformacional no ADN, que se curva uns 50°. A curvatura do ADn dá lugar a que as bases non queden ben situadas unhas enriba das outras, amplía o suco menor, e comprime o suco maior. Isto fai que o [[enlace fosfodiéster]] que vai ser cortado polo encima quede mías próximo ao [[centro activo]] do encima, onde pode ser cortado. A clivaxe ou corte ocorre dentro da secuencia de recoñecemento, e non require a [[hidrólise de ATP]].<ref name="Pingoud_&_Jeltsch_2001"/><ref>Zahran, M., Daidone, I., Smith, J. C., & Imhof, P. (2010). Mechanism of DNA recognition by the restriction enzyme EcoRV. Journal of molecular biology, 401(3), 415-432.</ref>
Binding of the enzyme induces a conformational change in the DNA, bending it by about 50°. DNA bending results in the unstacking of the bases, widening of the minor groove, and compression of the major groove. This brings the phosphodiester linkage to be broken closer to the active site of the enzyme, where it can be cleaved. Cleavage occurs within the recognition sequence, and does ''not'' require ATP hydrolysis.<ref name="Pingoud_&_Jeltsch_2001"/>
 
EcoRV isé thea only type II restrictionúnica [[endonucleaseendonuiclease]] knownde torestrición causede atipo II que se coñece que majorcausa protein-inducedun conformationalcambio changeconformacional inimportante theno DNAADN. <ref name=Pingoud_&_Jeltsch_2001>{{cite journal |author=Pingoud A, Jeltsch A |title=Structure and function of type II restriction endonucleases |journal=Nucleic Acids Research |volume=29 |issue=18 |pages=3705–3727 |year=2001 |pmid=11557805 |doi=10.1093/nar/29.18.3705 |pmc=55916 }}</ref>
 
== Usos ==
*[[EcoRII]], outra nuclease de ''E. coli''.
 
 
<ref>Zahran, M., Daidone, I., Smith, J. C., & Imhof, P. (2010). Mechanism of DNA recognition by the restriction enzyme EcoRV. Journal of molecular biology, 401(3), 415-432.</ref>
 
[[Categoría:EC 3.1.21]]
194.134

edicións

Menú de navegación