Método de Hall para bilirrubina

O Método de Hall utilizase para diferenciar un pigmento, de la bilirrubina, que é o principal pigmento da bile, resultando da degradación das células vermellas do sangue.

Existe un método para diferenciar conxuntamente a bilirrubina e a hematoidina (Método de Gmelin) pero o verdadeiro método para diferenciar a bilirrubina é o Método de Hall.

A intensidade da cor da tinción é proporcional á cantidade de bilirrubina que hai na mostra, pero se se encontraron restos de drogas e outras substancias será mais difícil a determinación da bilirrubina.

Fundamento

A acción oxidante do reactivo de Fouchet converte a bile en biliverdina verde, que, se foi transportada ó fígado e alí reducida, coñécese como bilirrubina. O rango de cor varía entre verde oliva e verde esmeralda, dependendo da concentración de pigmento bílico presente.

Tecido control e diana

O conduto biliar obstruído é positivo para esta técnica. O tecido, para mellores resultados, debe estar fixado en formol 10%, e seccionado a 4 micras.

Reactivos

1. Reactivo de Fouchet.
   1. 12,5gr ácido tricloroacético.
   2. 50cc auga destilada.
   3. 5cc cloruro férrico 10%.

Mesturar ben o tricloroacético e a agua, e engadir o cloruro férrico.

1. Solución de Van Gieson.
   1. 1cc fucsina ácida 1%.
   2. 45cc ácido pícrico saturado.

Procedemento

1. desparafinar e hidratar os cortes.
2. colocar na solución de Fouchet, 5 min.
3. lavar con auga destilada, 2 cambios de 2 min. en cada cubeta.
4. contrastar con Van Gienson, 3 min.
5. lavar con auga destilada, 30 seg.
6. deshidratar, aclarar e montar.

Resultados

• bilirrubina: verde.
• coláxeno: vermello.
• músculo e células epiteliais: amarelo.

Véxase tamén

Bibliografía

• ARP, ed. (1992). Métodos Histotecnológicos. Instituto de patología de las Fuerzas Armadas de los EEUU (AFIP). 
• Hall, M.J. (1960). American Clinical Pathology, ed. A staining reaction for bilirubin in sections of tissue. 

Ligazóns externas

• http://www.emsdiasum.com/microscopy/technical/datasheet/26611.aspx
• http://library.med.utah.edu/WebPath/HISTHTML/MANUALS/BILE.PDF